중합효소 연쇄반응, 일반적인 PCR 효소

PCR(중합효소연쇄반응)은 시험관 내에서 DNA 분자를 증폭시키는 데 일반적으로 사용되는 기술이며, PCR 효소는 이 반응의 핵심 구성 요소입니다. PCR 효소의 주요 유형에는 Taq 중합효소, Pfu 중합효소 및 Taq의 hot-start 변형이 포함됩니다. DNA 중합효소.

Taq 중합효소

Taq 중합효소는 널리 사용된 최초의 PCR 효소 중 하나였습니다. Thermus aquaticus라는 박테리아로부터 분리되었으며 내열성이 뛰어납니다. Taq 중합효소는 고온에서 안정적이며 PCR의 변성, 어닐링 및 확장 단계에 적합합니다. 그러나 Taq 중합효소는 3'-5' 핵 제거 보정 기능이 부족하여 GC 함량이 높은 영역에서 오류율이 높습니다.

Pfu 중합효소

Pfu 폴리머라제는 호열성 남조류로부터 분리되어 Taq 폴리머라제에 비해 내열성이 우수합니다. 3'-5' 엑소뉴클레오티드 교정 기능을 갖추고 있어 GC 함량이 높은 영역을 증폭할 때 오류율이 낮고 보다 정확한 증폭 산물을 생성합니다.

Taq DNA 중합효소의 Hot-start 변이체

Taq 중합효소는 더 높은 온도에서 활성화되어야 하기 때문에 PCR 반응 초기에 비특이적인 산물이 생성될 수 있습니다. 이 문제를 극복하기 위해 저온에서 불활성이고 고온에서 활성화 가능한 변이체를 포함하는 핫 스타트 PCR 효소가 도입되었습니다. 이는 PCR 반응 초기 단계에서 비특이적 산물의 생성을 줄여 특이성을 높이는 데 도움이 됩니다.

Taq 중합효소는 더 높은 온도에서 활성화되어야 하기 때문에 PCR 반응 초기에 비특이적 산물이 생성될 수 있습니다. 이 문제를 극복하기 위해 저온에서 불활성이고 고온에서 활성화 가능한 변이체를 포함하는 핫 스타트 PCR 효소가 도입되었습니다. 이는 PCR 반응 초기 단계에서 비특이적 산물의 생성을 줄여 특이성을 높이는 데 도움이 됩니다.