PCR 실험실에서 에어로졸 오염을 방지하는 방법

PCR(Polymerase Chain Reaction) 기술의 응용 및 개발은 질병 진단에 보다 효과적인 근거를 제시하게 되었으며, 특히 형광 정량적 PCR의 촉진 및 적용으로 검사의 민감도와 정확도가 크게 향상되었습니다. 그러나 병원체 검출 실험실에서 이 기술이 널리 사용되면서 PCR 실험실의 에어로졸 오염 문제가 점차 우려를 불러일으켰습니다. PCR 실험실 DNA/RNA 에어로졸 오염을 효과적으로 방지하기 위해 안정적이고 신뢰할 수 있는 테스트 결과를 얻기 위해 위양성을 방지하기 위해 PCR 실험실은 에어로졸 오염 오염을 방지하기 위해 엄격한 오염 방지 조치 및 해당 오염 모니터링 시스템을 수립하여 에어로졸이 발견되면 오염 문제에 대한 원인과 해당 솔루션을 신속하게 찾을 수 있습니다.

실험실 구역 설정

PCR 검사실은 관련 규정에 따라 시약준비부, 검체준비부, PCR 증폭부, 산물분석부 등 XNUMX개 부분으로 나누어야 하며 처음 XNUMX개는 전증폭부, 마지막 XNUMX개는 검사실이다. 증폭 후 섹션. 사전 증폭 영역과 사후 증폭 영역은 엄격하게 분리되어야 하며 섹션 간의 압력 차를 형성하기 위해 환기 및 정화 장치를 갖추어야 합니다. 실험 재료, 시약, 기록지, 펜, 청소 재료 등을 포함하는 작업 흐름은 증폭 전 구역에서 증폭 후 구역, 즉 시약 준비 구역 → 시료 처리 구역 → 증폭 구역 → 제품으로만 흐를 수 있습니다. 역방향으로 흐르지 않아야 한다. 공기 흐름이 작업 방향과 동일하도록 각 섹션, 해당 완충실 및 청정 복도 사이에 서로 다른 구배 압력 차이를 형성하면서 청정 복도에서 흐름을 역전시키는 것은 엄격히 금지됩니다.

컨트롤 설정

XNUMX개의 음성대조군(둘 다 물을 주형으로 사용, 하나는 핵산 추출에 관여하는 시료, 다른 하나는 추출에 관여하지 않는, 증폭 시스템 구성 시에만 추가)을 실험 전 매번 준비하여 모니터링한다. 실험실에서 에어로졸 오염을 파악하고 오염 여부와 원인을 파악하여 예방 및 제거 조치를 취할 수 있습니다. 실험 결과의 신뢰성과 정확성을 모니터링하기 위해 양성 대조군도 설정해야 합니다.

실험실 에어로졸 모니터링

연구실 공기는 가정용 공기청정기를 이용하여 주기적으로 정화하고, 공기중 에어로졸의 오염 정도를 파악하기 위해 정수기 내부의 필터를 물에 담가 혼합한 후 혼합수를 해당 시험용 시료로 사용합니다. 피펫 건, 추출기, 증폭기 및 기타 실험 도구의 내부와 표면에서 정기적으로 면봉 샘플을 수집하여 실험 도구의 오염을 이해하십시오.

엄격한 워크 플로우

PCR의 각 섹션에는 색상으로 구분할 수 있는 고유한 작업복이 장착되어 있으며 각 섹션에 들어갈 때 해당 작업복을 변경해야 합니다. 한편, 청정복도의 입구에는 입장 시 갈아입어야 하는 PCR실 전용 신발이 설치되어 있으며 각 구역 앞에 펠트매트가 설치되어 있다. 청정 복도에 있는 실험실 직원은 시약 준비 구역 방향에서 결과 분석 구역 방향으로만 이동할 수 있으며 조건이 허용되는 경우 각 섹션에는 다른 직원이 배치되어 있어 각 섹션의 직원이 서로 주위를 이동합니다.

청소 및 소독 강화

실험실을 잘 청소하고 소독하는 것은 실험실에서 에어로졸 오염을 방지하는 효과적인 방법입니다. 실험실 청소 범위에는 작업 표면(테스트 벤치, 울트라 클린 벤치 및 보관 캐비닛 등), 기구 및 장비 표면(원심 분리기의 회전 헤드, DNA 추출을 위한 가열 블록, 증폭기의 샘플 슬롯, 피펫)의 청소가 포함됩니다. 피펫팅용 막대, 유전자 분석기의 스파이크 슬롯 등), 재사용 도구 또는 기구 등

실험 시작 전후에 위에서 언급한 부위 및 기구의 표면을 새로 준비한 10% 차아염소산나트륨 용액으로 반복적으로 닦은 다음 75% 에탄올로 문질러 잔류물을 제거하고 실험은 알코올이 증발했습니다. 이는 표면에 부착된 다양한 오염 물질을 효과적으로 제거할 수 있습니다. 동시에 실험실은 자외선 조사로 정기적으로 소독됩니다.