Classic Cell Culture Media 소개, 배지 선택 방법은?

DMEM, RPMI 1640, MEM 및 DMEM/F12와 같은 많은 종류의 고전적인 세포 배양 배지가 가장 널리 사용됩니다. M199, IMDM 및 L15 배지와 같은 다른 것들도 특정 세포를 배양하는 데 사용됩니다. 이들 세포배양액의 특성 및 용도는 다음과 같다.

1. BME 세포 배양 배지

Basic Eagle 배지는 1955년 Eagle에 의해 설계되었으며 BSS + 12종의 아미노산 + 글루타민 + 8종의 비타민을 함유하고 있습니다. MEM, DMEM, IMDM 등 세포배양배지의 개량품종을 기반으로 간단하고 첨가하기 쉬우며 다양한 계대세포주 및 특수연구용으로 적합합니다.

2. MEM 세포 배양 배지

이는 1959년 Eagle's basic medium(BME)에서 개량하여 라이신과 비오틴을 제거하고 아미노산 농도를 높인 것이다. 그러나 제한된 영양분 함량으로 인해 반드시 생산 특이적 세포 배양에 가장 적합한 배지는 아닙니다.

3. DMEM 세포 배양 배지

DMEM은 원래 마우스 섬유아세포용으로 설계된 Dulbecco가 수정한 Eagle 배지입니다. DMEM은 MEM의 아미노산 농도가 3배, 비타민 농도가 MEM의 2배이며 더 나은 완충을 위해 HCO1000 및 CO4500 농도를 XNUMX배로 사용합니다. 원래 제형에는 XNUMXmg/L의 포도당이 포함되어 있었는데, 이는 나중에 종종 저혈당 및 고혈당이라고 하는 특정 세포의 성장을 위해 XNUMXmg/L로 조정되었습니다.

저당은 의존성 부착 세포 배양, 특히 성장 속도가 빠르고 접착력이 약한 종양 세포 배양에 적합합니다. 고당은 고밀도 현탁 세포 배양, 접착력이 좋지 않지만 원래 성장점에서 분리되는 것을 원하지 않는 클론 배양, 하이브리도마에서 DNA로 형질감염된 골수종 세포 및 형질전환 세포의 배양에 더 적합합니다.

4. IMDM 세포 배양 배지

Guilber 및 Iscove는 적혈구 및 대식세포 전구체 배양을 위해 Dulbecco' 배지를 Iscove 배지로 수정했습니다. IMDM 세포 배양 배지에는 셀레늄, 추가 아미노산 및 비타민, 피루브산나트륨 및 HEPES가 포함되어 있으며 질산철을 질산칼륨으로 대체합니다. IMDM은 또한 마우스 B 림프구, LPS 자극 B 세포, 골수 조혈 세포, T 세포, 및 림프종 세포. IMDM은 매우 영양이 풍부한 배양 배지이며 고밀도 세포의 빠른 증식에 사용될 수 있습니다.

5. RPMI-1640 세포 배양 배지

Moore 등이 개발했습니다. 1967년 Roswell Park Memorial Institute에서 림프구 배양용으로 설계되었으며 BSS + 21종의 아미노산 + 11종의 비타민이 함유되어 있습니다. 현재는 포유류, 특수 조혈 세포, 정상 또는 악성 증식 백혈구 및 하이브리도마 세포와 같은 현탁 세포 배양에도 사용됩니다. K-562, HL-60, Jurkat, Daudi, IM-9, T 세포 림프종 세포 및 HCT-15 상피 세포와 같은 다른 성인 림프구를 참조로 사용할 수 있습니다.

6. HamF10 세포 배양 배지

1963 미량 원소를 함유한 햄 디자인은 혈청 함량이 낮을 때 사용할 수 있어 복제 배양에 적합합니다. f10은 햄스터 및 인간 이배체 세포에 적합하며 특히 양수 세포 배양에 적합합니다.

7. DMEM/F12 세포 배양 배지

Ham's F12는 낮은 혈청 농도에서 CHO 세포를 클로닝하도록 설계되었으며 현재 클론 형성률 및 12차 배양 분석에 널리 사용되고 있습니다. FXNUMX는 또한 DMEM 및 기타 용량과 함께 사용하여 다양한 제품의 고농도 및 조성을 얻을 수 있습니다. 이 배지는 많은 XNUMX차 배양에 적용되어 왔으며, 세포주의 배양을 키우기가 더 어렵습니다. 또한 영양성분이 풍부하고 혈청을 적게 사용할 수 있기 때문에 무혈청 배양을 위한 기본 배지로 자주 사용됩니다.

8. M199 세포 배양 배지

M-199 배지는 Morgan 등이 설계한 화학 조성이 정의된 세포 배양 배지입니다. BSS 외 1950가지 성분을 함유하고 있으며 병아리 배아 섬유아세포 배양에 주로 사용되는 종합배지입니다. 장기 배양을 지원하려면 m-53 배지에 혈청을 보충해야 합니다. 그것은 기원의 많은 종의 세포를 배양하는 데 사용할 수 있으며 형질감염된 세포를 배양할 수 있으며 현재 바이러스학 및 백신 생산에 널리 사용됩니다.

9. McCoy5A 매체

McCoy5A 배지는 1959년 MeCoy가 육종 세포용으로 설계한 세포 배양 배지이며 BSS 및 기타 40가지 성분을 포함합니다. 다양한 29차 이식편(골수, 피부, 폐, 비장 등)의 성장을 지원할 수 있으며 일반적인 100차 이식 외에 주로 조직 생검 배양, 일부 림프구 배양, 배양이 어려운 일부 세포의 성장 지원에 사용됩니다. 세포 배양 - 예를 들어 Jensen 쥐 육종 섬유아세포, 인간 림프구, HT-XNUMX, BHL-XNUMX 및 기타 상피 세포.

10. L15 세포 배양 배지

L-15 배양 배지는 빠르게 증식하는 종양 세포의 배양에 적합하며 CO2가 없는 상태에서 종양 세포주를 배양하는 데 사용됩니다. 이 배양 배지는 아미노산 조성이 더욱 개선되고 포도당이 갈락토스로 대체된 인산염 완충 시스템을 사용합니다.

세포 배양 배지를 선택하는 방법은 무엇입니까?

1. 참고문헌을 확인하시거나 세포주 구매 시 참고하실 수 있습니다. 세포주 데이터베이스 도구가 있는 Invitrogen 웹사이트와 같은 일부 생물학 회사의 웹사이트에서 검색할 수도 있습니다. 관심 있는 세포 유형을 선택하면 권장 배지, 혈청 및 형질감염 시약 등이 팝업으로 표시되며, 때로는 최적화된 형질감염 단계가 표시되어 매우 편리합니다.
2. 다른 실험실에서 사용되는 일반적인 배지를 참조할 수도 있으며, 그 중 다수는 다중 세포 배양에 적합합니다.
3. 세포주의 특성과 실험의 필요에 따라 배지를 선택하십시오. 예를 들어 마우스 세포주는 대부분 RPMI1640으로 선택됩니다.
4. 다양한 배지를 사용하여 target cell을 배양하고 성장 상태를 관찰합니다. 생육곡선, 집락형성률 등의 지표를 이용하여 실험결과에 따라 최적의 배지를 선택하는 것이 가장 객관적인 방법이지만 번거로운 방법입니다.